為更好地反映熱炎寧合劑內(nèi)在質(zhì)量,完善質(zhì)量標 準,本研究中建立了其高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜 分析方法,并對其主要藥效成分綠原酸、秦皮乙素、咖 啡酸、虎杖苷、野黃芩苷、木犀草素、芹菜素和大黃素含 量進行測定,為高效控制和評價熱炎寧合劑的質(zhì)量提 供依據(jù)。儀器:e2695 Alliance型高效液相色譜儀,包含DAD 紫外檢測器(美國 Waters 公司);Mettler XP6 型電子分 析天平(瑞士Mettler Toledo公司);BSA124S型電子分析 天平(北京賽多利斯科學儀器有限公司);KQ - 250E型 數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。
采用 DAD 檢測器全波長掃描樣品溶液, 結(jié)果綠原酸、秦皮乙素、咖啡酸、虎杖苷、野黃芩苷、木 犀草素、芹菜素的最大吸收波長分別為 325,323,232, 306,335,349,338 nm,大黃素最大吸收波長為 254 nm, 以指紋圖譜基線平穩(wěn)、色譜峰較多,各色譜峰間分離效 果好為指標,使用儀器固定波長變換程序功能經(jīng)多次 試驗確定采用325,254 nm分段波長法作為樣品指紋圖 譜和8個有效成分含量測定的采集波長。分別考察了不同比例甲醇水溶液和乙醇 水溶液作為提取溶劑,超聲和加熱回流兩種提取方 法,以及不同提取時間(30,45,60 min)對 8 個指標成 分和指紋圖譜的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),70% 甲醇溶液超聲處 理 30 min為最佳提取方法。